برای تماس روی پست الکترونیک کلیک کنید.

در کارخانه جات تولید مواد غذایی برای بررسی موادغذایی نسبت به آلودگی های قارچی ، ابتدا ماده غذایی را در محیط کشت رشد می دهند. اگر ماده غذایی آلوده باشد میکروارگانیسم ها در محیط کشت رشد می کنند و اگر قارچی بر روی محیط رشد کرده باشد ، با بررسی ماکروسکوپی آن می توان جنس آن را تشخیص داد. اگر احتیاج به مشخص کردن گونه قارچ باشد باید آنرا با میکروسکوپ بررسی کنیم.

بعد از مشخص کردن دقیق جنس و گونه قارچ می توانیم اقدامات لازم جهت تخریب یا حذف آنها را اعمال کنیم و ماده غذایی را پاک سازی کنیم.

چیزی که حائز اهمیت است ، خسارت زایی قارچ ها بعد آلوده کردن مواد غذایی است ، پس بهتر است این آزمایشها در در بازه های زمانی کوتاه انجام گیرد تا از بروز خسارات اقتصادی بزرگ جلوگیری شود.

حال ما در اینجا نمونه ای از این آزمایش ها را بررسی می کنیم. در واقع فقط قارچ ها را از نظر میکروسکوپی بررسی می کنیم.

هدف از انجام این آزمایش بررسی میکروسکوپی پنی سیلیوم ، آسپرژیلوس و مخمر ساکارومایسس است.

 تئوری آزمایش:

 وسایل مورد نیاز برای انجام آزمایش عبارتند از :

لام ، لامل ، آنس حلقوی ، محلول KOH ، محلول لاکتو فنول ، کریستال ویوله ، میکروسکوپ ، روغن سدر ، نمونه هایی از پنی سیلیوم ، آسپرژیلوس و ساکارومایسس

روش کار:

بعد از آماده کردن وسایل مورد نیاز می توانید آزمایش را شروع کنید. ابتدا یک لامل بر داشته و یک قطره KOH روی آن می ریزیم. با استفاده از آنس حلقوی استریل شده ، مقداری از کپک های سطح پلیت حاوی کپک آسپرژیلوس برداشته و در قطره KOH به آرامی تکان می دهیم تا کپک ها در قطره پخش شوند. این کار باید با دقت و به آرامی انجام شود تا به کپک ها آسیب نرسد. یک لامل برداشته و روی آن قرار می دهیم و اسلاید آماده شده را با بزرگ نمایی 40X مشاهده می کنیم.

یک بار دیگر همین کار را با محلول لاکتوفنول تکرار می کنیم یعنی به جای محلول KOH از محلول لاکتوفنول استفاده می کنیم و با همان بزرگ نمایی مشاهده می کنیم.

مراحل قبل را تنها با محلول لاکتوفنول ، برای کپک پنی سیلیوم انجام می دهیم و بعد از تهیه اسلاید آنرا با بزرگ نمایی 40X می توانیم مشاهده کنیم.

تهیه اسلاید مخمر ساکارومایسس با دو نمونه قبلی متفاوت است. برای این کار یک قطره سرم فیزیولوژی روی لام می ریزیم و مخمر را از پلیت حاوی آن به وسیله آنس حلقوی برداشته و در قطره سرم پخش می کنیم. آنرا روی شعله میگیریم تا تثبیت شود. سپس ماده رنگی کریستال ویوله را روی آن می ریزیم و بعد 30ثانیه آنرا با آب مقطر شستشو می دهیم. لام را کناری میگذاریم تا خشک شود البته برای افزایش سرعت کار می توانیم از نور لامپ برای خشک کردن استفاده کنیم. پس از خشک شدن ، آنرا زیر میکروسکوپ قرار می دهیم و یک قطره روغن سدر روی آن می ریزیم و با بزرگ نمایی 100X مشاهده می کنیم.

شرح عملی آزمایش:

برای انجام این آزمایش از پلیت هایی که خودمان در هفته پیش آماده کرده بودیم ، استفاده کردیم. البته نمونه مخمر را از پلیت گروه دیگری که مخمر در آن رشد بهتری داشت برداشتیم.

ابتدا یک لام تمیز را برداشتیم و یک قطره KOH به وسیله قطره چکان روی آن قرار دادیم. آنس حلقوی رابا شعله استریل کردیم ، سپس از پلیت حاوی کپک آسپرژیلوس که مربوط به نمونه ی نان بود ، توسط آنس حلقوی مقداری از کپک را برداشتیم و در قطره ی KOH پخش کردیم و آنرا با بزرگ نمایی

40 X بررسی کردیم. کپک آسپرژیلوس دارای ساختاری شبیه گل بود ، که دارای کنیدیوفورهای طویل و تقریبا بی رنگی داشت و در انتهای هر کنیدیوفور بر آمدگی کروی و یا بیضی شکلی به صورت حباب مشهده کردیم که به آن ویسل می گویند.

با دیگر مراحل بالا را انجام دادیم ، با این تفاوت که به جای محلول KOH از محلول لاکتوفنول استفاده می کنیم که باعث رنگی شدن کپک ها شده و مشاهده را بهتر و واضح تر می کند.

 برای مشاهده کپک پنی سیلیوم موجود در نمونه آلوده ی رب  نیز مانند روش بالا از کپک پنی سیلیوم گسترش تهیه کردیم، با این تفاوت که فقط از محلول لاکتوفنول استفاده می کنیم.

پس از تهیه گسترش آنرا زیر میکروسکوپ قرار دادیم و با بزرگ نمایی 40X  بررسی کردیم. ساختاری شبیه جارو دیده شد و کنیدیوفورها به صورت ساده ، راست و طویل بر روی میسیلیوم ها قابل مشاهده بودند

برای تهیه ی اسلاید مخمر ساکارومایسس ، ابتدا یک قطره سرم فیزیولوژی روی لام ریختیم و با استفاده از آنس حلقوی استریل ، مقداری ار کلونی های تشکیل شده در سطح محیط کشت را برداشتیم و در سرم حل و آنرا روی لام پخش کردیم. لام را روی شعله گرفتیم و آنرا به صورت دورانی

حرکت دادیم تا تثبیت شود. پس از تثبیت روی آن به مدت 30 ثانیه کریستال ویوله ریختیم و بعد از این مدت زمان آنرا با آب شستشو دادیم. لام را زیر نور لامپ قرار دادیم تا خشک شود. پس از خشک شدن ، لام را زیر میکروسکوپ قرار دادیم و روی آن یک قطره روغن سدر ریختیم و با عدسی 100X  

آنرا بررسی کردیم. از نظر شکل ظاهری این مخمر ها به شکل بیضوی و کروی بودند و زنجیره هایی را به دنبال هم تشکیل می دهند که ایجاد یک میسیلیوم کاذب ابتدایی را به دنبال دارند.

روشهای کاهش سرمازدگی به زبان انگلیسی (3.5 مگابایت) 

Some cup fungi use a bursting cell to "shoot" spores through the boundary layer. In cup fungi, the spores are contained within a special cell called the ascus. Fungi whose spores are contained in an ascus are known as AscoClick.

 the link to see some photographs of mushrooms with gills and mushrooms without gillsmycetes

نماتد کیست غلات، Heterodera avenae،نخستین بار در سال 1874 در آلمان به عنوان آفت غلات شناخته شد. امروز، این نماتد مهمترین نماتد بیماریزای جو بشمار می­رود و در اروپای شمالی، خاورمیانه، ژاپن، استرالیا و نیوزلند یافت می­شود. در آمریکای شمالی در اونتاریو در کانادا و در یکی از شهرستانهای اورگون غربی یولاف پیدا شده است. تاکنون در ایالات متحده این نماتد روی جو دیده نشده است.تنها اعضای خانواده گندمیان شامل یولاف، گندم بهاره و بسیاری از علف­های گندمی مورد حمله قرار می­گیرند. خسارت در خاک­های شنی و سبک حداکثر است ولی محدود به این خاکها نمی­شود. در جو کاهش محصول به میزان 22% - 0 گزارش شده است که این به رقم زراعی، جمعیت نماتد، و محیط بستگی دارد. معمولاً هنگامی خسارت اقتصادی رخ می­دهد که سطح جمعیت به 3 تخم یا بیشتر در هر گرم خاک برسد.

علائم:در بوته­هایی که از H.avenae آسیب جدی دیده­اند، ریشه­های آلوذه از نزدیک نقطه تهاجم تقسیم می­شوند و هر انشعاب به دو ریشه تقسیم می­شود.

 در نتیجه، سیستم ریشه­ای در گیاهان بیمار کوتاه، متراکم، گره­دار و دارای تعداد زیادی انشعاب خواهد بود. کیست­های سفید نابالغ از زمان خوشه رفتن به بعد روی ریشه­ها ظاهر میشوند. حضور کیست یک عامل تشخیص کلیدی نماتد کیست غلات است. کیست، بدن متورم و تغییر شکل یافته نماتدهای ماده است. کیست­ها به تدریج که بالغ می­شوند قهوه­ای تیره می­شوند. اگر ریشه­هایی که تازه از زمین خارج شده­اند چند دقیقه در معرض جریان هوا خشک شوند، کیست­ها بهتر دیده خواهند شد.علائم در اندام هوایی اختصاصی نیستند. بطور کلی، رشد گیاه کاهش می­یابد، و برگها تغییر رنگی شبیه کمبود شدید نیتروژن یا فسفر نشان می­دهند. سطح برگ کاهش می­یابد و ظهور نخستین برگها به تأخیر می­افتد. به موازات تأخیر زمان ظهور خوشه، تعداد سنبلکهای هر خوشه نیز کاهش می­یابد. آلودگی شدید به H.avenae در مزرعه معمولاً از پیدایش لکه­هایی از بوته­های کوتوله که به حالت اول برنمیگردد و در آنجا گیاهان هرز آسانتر توسعه می­یابند، مشخص می­شود

 Plant pathology is the study of plant disease and the pathogens that cause disease. By its nature, plant pathology is a multidisciplinary field that integrates microbiology, plant science, environmental science and other disciplines. New knowledge generated by research is used to further the discipline of plant pathology and to develop new and effective means of disease management for our stakeholders 

قارچ میکوریزای اکتوتروف معمولا به صورت یک غلاف ضخیم یا پوشش میسلیوم در اطراف ریشه ها مشاهده می شود، به طوری که بعضی از رشته های میسلیوم به حد فاصل بین سلول های پوستی نفوذ می کند. هیف های قارچ به درون سلول های پوست نفوذ نمی کنند، اما در عوض این سلول ها به وسیله ی شبکه ای از هیف که اصطلاحا شبکه ی هارتیگ  نامیده می شود ،  احاطه می گردد. اغلب میسلیوم های قارچ  آن قدر گسترده هستند که مجموع حجم آن ها با حجم ریشه ها ی مربوط قابل قیاس است. میسلیوم ها ی قارچ به داخل خاک نیز توسعه یافته و دور از این پوشش فشرده میسلیوم ، هیفای ریشه شکل و طناب های هیفی ( که اندام ها ی میوه دهند ه را در بر می گیرند) تولید می کنند. ظرفیت جذب عناصر غذایی سیستم ریشه به دلیل وجود هیف های قارچ که می توانند به مناطقی فراتر از منطقه ی تخلیه ی عناصر غذایی در اطراف ریشه دسترسی یابند ، افزایش می یابند. قارچ میکوریزای اکتوتروف فقط به گونه های  درختی مانند باز دانگان و نهاندگان چوبی سرایت می کند.

بر خلاف قارچ میکوریزای اکتوبوف، قارچ میکوریزای دارای وزیکول - آربوسکول ، پوشش میسلیومی فشرده ای در اطرا ریشه ها تولید نمی کند. در عوض هیف ها با تراکم کمتر، در هر دو جهت داخل ریشه و خاکهای اطراف رشد می کند. پس از آنکه هیف از طریق اپی درم با ریشه های موئین به  داخل ریشه را ه یافت ، هیف  نه تنها در مناطق بین سلولی گسترش می یابد، بلکه به سلولهای پوستی نیز نفوذ می کن. سلول هیف ، در  داخل می تواند ساختمان تخم مرغی شکلی به نام وزیکول و ساختمان منشعبی به نام آربوسکول ایجاد کند. این گونه به نظر می رسد که آربوسکول ها مکانهایی انتقال عناصر غذایی بین گیاه میزبان و قارچ باشند. خارج از ریشه، میسلیوم خارجی می تواند چندین سانتی متر از ریشه فاصله گرفته و احتمالاً ساختمانهایی برای تولید هاگ نیز تشکیل دهد. بر خلاف میکوریزای اکتوتروف، میکوریزای دارای وزیکول – آربوسکول تنها توده ی کوچکی از مواد قارچی می سازد که کمتر از ده درصد وزن ریشه را تشکیل می دهد. میکوریزای دارای وزیکول – آربوسکول تقریباٌ در ریشه ی تمام گونه ها ی نهاندانه ی علفی به جز برخی از گونه ها ی خانواده ی اسفناج پیدا می شود.

فایده ی وجود میکوریزا :

وجود ارتباط بین میکوریزای دارای وزیکول -  آربوسکول و ریشه های گیاه، جذب فسفر و عناصر کم مصرفی مانند روی و مس را تسهیل می کند.  با کاهش فسفر در اطراف ریشه، میسیلیوم ها در مناطق دور تر از ریشه، امکان جذب فسفر را افزایش می دهند. این ساختار می تواند تا چهار برابر بیشتر فسفات را نسبت به ریشه های غیر همزیست جذب کند.   افزون بر این تصور می شود که میکوریزای اکتوتروف ممکن است در بقایای آلی خاک تکثیر شده و موا د آلی فسفر دار را برای انتقال به ریشه تجزیه  کند. احتمالا نشت و مرگ هیف های قارچ عامل انتقال عناصر غدایی از قارچ میکوریزا ی به گیاه می باشد.

درجذب عناصر غذایی توسط میکوریزای اکتوتروف مواد معدنی فسفر دار به سادگی از هیف ها به شبکه ی هارتیگ تراوش کرده و به وسیله ی ریشه جذب شود. اما در میکوریزای دارای وزیکول – آربوسکول وضعیت پیچیده تر است. عناصر غذایی ممکن است از آربوسکول های سالم به داخل سلول آلوده رها شده و سپس در سلول های پوست ریشه منتشر شود . امکان دیگر این است که زوال یک آربوسکول سرشار از عناصر غذایی به معنای دسترسی سلول های گیاه میزبان به این محتویات باشد که این مواد نهایتا در سرتاسر گیاه توزیع می شوند.

کمبود یک عنصر غذایی از قبیل فسفر، موجب افزایش آلود گی به میکوریزای  می شود. حال آنکه رشد گیاه در یک خاک خاصل خیز ممکن است توسعه ی میکوریزا را کاهش دهد.   معمولا آلودگی میکوریزا یک رابطه ی دو طرفه است به این شکل که میکوریزا قند ها را از گیاه میزبان دریافت کرده و به راندمان جذب عناصر غذایی در گیاه کمک می کند